Teste de 3

Precisão observada com o uso de gotas de sangue seco coletadas para triagem neonatal

por Patrícia Inácio, PhD | 30 de agosto de 2023

Medir os níveis de 3-O-metildopa (3-OMD) nas manchas de sangue seco usadas em programas de triagem neonatal pode ajudar no diagnóstico da deficiência de L-aminoácido descarboxilase aromática (AADC) no início da vida, sugere um estudo em Taiwan.

Os resultados de 157.371 recém-nascidos mostraram que seis dos oito bebés com níveis de 3-OMD acima do normal apresentavam mutações causadoras de doenças e desenvolveram sintomas de deficiência de AADC.

O teste “poderia ser facilmente integrado nos programas de rastreio neonatal existentes e facilitar a aplicação futura para diagnóstico precoce e tratamento eficaz”, escreveram os investigadores.

O estudo, “Determinação simplificada de 3-O-metildopa em manchas de sangue seco: triagem prospectiva para deficiência de l-aminoácido descarboxilase aromática”, foi publicado na revista Molecular Genetics and Metabolism.

Normalmente, a deficiência de AADC é causada por mutações em ambas as cópias do gene DDC, que fornece a informação para a produção da L-aminoácido descarboxilase aromática, uma enzima também conhecida como AADC.

Esta enzima é necessária para produzir dois neurotransmissores principais: dopamina e serotonina. Neurotransmissores são substâncias químicas usadas pelas células nervosas para se comunicarem entre si.

As mutações fazem com que a enzima seja defeituosa ou produzida em níveis abaixo do necessário. Isto leva a sintomas que se manifestam mais comumente nos primeiros seis meses de vida, incluindo baixo tônus ​​muscular e incapacidade de atingir marcos de desenvolvimento.

No entanto, um diagnóstico de deficiência de AADC “frequentemente atrasado pela baixa consciência da doença e pela [falta de] exames laboratoriais específicos”, escreveram os investigadores.

O uso generalizado de uma forma relativamente fácil e rápida de diagnosticar esta doença também é de importância crescente, com um primeiro tratamento modificador da doença, a terapia genética Upstaza (eladocagene exuparvovec), aprovada na União Europeia e no Reino Unido

Estudos demonstraram que medir os níveis de 3-OMD em manchas de sangue seco pode ajudar a diagnosticar a deficiência de AADC. Sem uma enzima AADC funcional, os precursores da dopamina, como a L-dopa, acumulam-se no interior das células e são decompostos em 3-OMD, de modo que também está presente em níveis elevados em pacientes com deficiência de AADC.

Investigadores em Taiwan demonstraram anteriormente que as medidas 3-OMD poderiam ser integradas em programas de rastreio neonatal, utilizando uma única amostra de sangue seco recolhida poucos dias após o nascimento.

Os níveis de 3-OMD ajudaram a identificar quatro recém-nascidos com deficiência de AADC de um total de 127.987 recém-nascidos, e estes bebés puderam participar em ensaios de terapia genética, “resultando numa melhoria motora e cognitiva significativa”, escreveu a equipa.

Esta mesma equipe descreveu agora um método rápido e altamente específico para rastrear a deficiência de AADC como parte da triagem neonatal de rotina para erros metabólicos congênitos em Taiwan.

Amostras de sangue seco coletadas 48 horas após o nascimento foram analisadas pela primeira vez para 3-OMD e outros metabólitos usando o kit NeoBase 2, que usa uma técnica chamada espectrometria de massa em tandem de análise de injeção de fluxo para identificar e quantificar moléculas.

O uso de um kit reduz o tempo e a preparação da amostra e permite que os pesquisadores realizem centenas de testes por dia.

Amostras com níveis de 3-OMD fora da faixa normal foram analisadas novamente com uma técnica mais específica, chamada espectrometria de massa em tandem por cromatografia líquida de alta eficiência.

Se o nível de 3-OMD fosse novamente superior ao normal (500 nanogramas por mililitro, ou ng/mL), o recém-nascido era encaminhado ao hospital dos pesquisadores para exame físico e testes genéticos para confirmar a deficiência de AADC.

Entre fevereiro de 2020 e dezembro de 2022, foram analisadas manchas de sangue seco de 157.371 recém-nascidos com o kit NeoBase 2. Um total de 114 amostras (0,1%) foram testadas com a técnica mais específica, e oito delas apresentaram níveis anormais de 3-OMD, variando entre 839 e 5.170 ng/mL.